2.9加样回收率试验
称取已知含量的咖啡川芎生品粉末(CX-SP)9份，每份约1.5g，酸和酸为素精密称定，阿魏每3份为一组，指标制因分别精密加入对照品咖啡酸、从不川芎阿魏酸的同炮探究量相当于川芎粉末中两种成分含量的80%、100%、角度酒炙机理120%，咖啡制备供试品溶液，酸和酸为素计算加样回收率，阿魏结果见表1。指标制因
2.10样品测定
称取不同的从不川芎川芎样品各3份，每份约3.0g，同炮探究精密称定。角度酒炙机理按供试品制备方法制备样品并测定，咖啡记录峰面积，计算川芎样品中咖啡酸和阿魏酸的含量，结果见表2。
将黄酒润制后炮制不同时间和水润制后炮制不同时间的川芎中咖啡酸和阿魏酸的含量分别进行比较，如图2所示。将炮制前后咖啡酸和阿魏酸的含量变化及机理从加热因素、炒制时间和炮制辅料三方面解释：(1)加热因素，黄酒闷润的川芎经炒制不同时间后，其所含咖啡酸及阿魏酸的含量均比没有经过加热炒制即黄酒润制后直接自然晾干的川芎高，且均比川芎生品高。
(2)炒制时间，黄酒闷润的川芎中咖啡酸和阿魏酸的含量随炒制时间延长均有升高趋势，二者均在炒制20min时含量最高，之后逐渐降低，二者的变化趋势相近。(3)辅料影响，黄酒闷润的川芎样品中咖啡酸和阿魏酸的含量均比川芎生品高。
不同浓度“醇炙”川芎样品中咖啡酸和阿魏酸的含量变化如图3所示。由图可知，川芎经不同浓度乙醇闷润炒制20min后，咖啡酸和阿魏酸的含量均比相同浓度乙醇闷润后自然晾干的川芎样品高，含量增高的原因为加热炒制。不同浓度“醇炙”后，川芎样品中两种成分的含量与生品相比，几乎没有显著变化。在炒制时间同为20min时，酒炙川芎样品中咖啡酸和阿魏酸的含量显著高于不同浓度“醇炙”川芎样品，其中阿魏酸含量比与黄酒含醇量相近的10%“醇炙”川芎高出近一倍。此外，不同浓度乙醇闷润川芎样品之间咖啡酸和阿魏酸的含量变化均不显著。
黄酒中除含有一定量的乙醇外，水分的含量较高，因此文章设计了蒸馏水润制，与黄酒润制进行对照。结果发现，蒸馏水润制之后炒制10,15,20min的川芎样品中两种成分的含量均较生品高，也高于不同浓度乙醇润制后炒制20min的川芎样品。由上可知，与川芎生品相比，酒炙后咖啡酸和阿魏酸含量的显著升高可能不是黄酒中含有乙醇和水的原因。
3讨论
3.1测定指标的选择
酚酸类化合物是川芎中重要的一类化学成分，具有很多生物活性，本课题组前期指纹图谱研究发现川芎酒炙后阿魏酸含量明显升高，并且阿魏酸是中国药典中川芎质量控制的指标成分。与阿魏酸的结构相近，咖啡酸也是川芎中的一种酚酸类成分，并且为阿魏酸的生物合成前体。本研究以咖啡酸和阿魏酸为含量测定指标，通过改变不同炮制因素来探讨川芎酒炙机理。
3.2“醇炙”川芎的选择
有研究者认为黄酒中的乙醇可以提高某些成分的溶出而增强药效，本实验所用黄酒含有12%的乙醇，考虑到乙醇可能会影响酒炙后咖啡酸和阿魏酸的含量，故本研究采用不同浓度的乙醇在与制备酒炙川芎相同的条件下炮制川芎饮片，文章中简称为“醇炙”川芎。
3.3讨论
从含量测定结果可以看出，酒炙川芎样品中咖啡酸和阿魏酸的含量均比黄酒润制后不经过加热炒制而直接自然晾干的川芎样品高，说明加热是影响两成分含量变化的重要因素。随炒制时间的延长，酒炙川芎中咖啡酸和阿魏酸的含量变化趋势大体一致，均有升高趋势，且炒制20min时含量最高，之后含量又随之降低，说明炒制时间不是越长越好，20min为最佳炮制时间。
乙醇为黄酒中的主要组成成分，考虑到不同黄酒含有不同浓度的乙醇，本研究制备了不同浓度乙醇炮制的“醇炙”川芎样品，其咖啡酸和阿魏酸含量与生品相比均无明显增加，且不同浓度乙醇炮制的“醇炙”川芎样品之间两种成分的含量变化也不显著，说明黄酒中的乙醇对川芎中咖啡酸和阿魏酸含量的影响较小。此外，本实验所用黄酒含醇量为12%，故将黄酒闷润炒制20min和10%乙醇闷润炒制20min的川芎进行比较，发现酒炙川芎样品中咖啡酸和阿魏酸的含量均显著高于“醇炙”川芎。
水也为黄酒中的主要组成成分，用蒸馏水闷润川芎并分别炒制5、10、15、20min，两成分的含量和生品相比均有所升高。炒制20min时，两成分的含量均高于不同浓度乙醇闷润后炒制20min的“醇炙”川芎样品，但略低于黄酒闷润后炒制20min的酒炙川芎样品。
传统理论认为，酒炙增强功效的原因在于黄酒中的乙醇可以起到对有效成分增溶的作用。本研究发现酒炙确实可以增高川芎中咖啡酸和阿魏酸的含量，但可能并不是由于黄酒中含有乙醇。仅用蒸馏水润制之后进行炒制，咖啡酸和阿魏酸的含量同样也能增加，且比采用不同浓度乙醇闷润的“醇炙”样品含量高，其原因可能为生川芎饮片中依然存在一部分没有失去活性的酶，水分的引入，文火的加热，使这些酶依然可以将阿魏酸从纤维素结构中水解，从而使阿魏酸含量增高。
综上所述，加热、炒制时间和辅料黄酒均是影响酒炙川芎的重要因素，且文火炒制20min为最佳炮制时间。酒炙川芎中阿魏酸的含量比“醇炙”和水润炒制品均高，其原因，经查阅文献，发现黄酒本身也含有少量的阿魏酸，故川芎酒炙增效的原因可能来源于黄酒和川芎中阿魏酸量的叠加。此外黄酒中含有大量的氨基酸和酯类物质，是否这些物质的共同作用是“酒炙增效”的原因还需要进一步进行实验探索。
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